出品公司:	ATCC
細胞名稱:	ATCC CCL-248~T84~人結腸腺癌肺轉移細胞
存儲人:	H Masui
種屬來源:	人
組織來源:	結腸
疾病特征:	結直腸癌
細胞形態:	上皮細胞樣
生長特性:	貼壁生長
培養基:	D-MEM/F-12培養基(GIBCO,貨號12400024)，95%；FBS，5%。
產品目錄號:	CCL-248
生長條件:	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37  ℃,
傳代方法:	1：2至1：6，每周2次。
凍存條件:	90% 完全培養基+10% DMSO，液氮儲存
支原體檢測:	陰性
**等級:	1
應用:	該細胞可以作為轉染宿主細胞。
STR:	Amelogenin: X CSF1PO: 10 D13S317: 9 D16S539: 10,11 D5S818: 12 D7S820: 8,10 THO1: 6,9 TPOX: 8,11 vWA: 17,18
同工酶:	AK-1, 1 ES-D, 1 G6PD, B GLO-I, 1-2 Me-2, 1-2 PGM1, 1 PGM3, 1
備注:	Nucleotide (GenBank) : BE519991 EST-TIG1 cDNA from T84 cells Homo sapiens cDNA, mRNA sequence.
聯系方法:	何經理，合肥星肽生物科技有限公司，Tel：0551-63802898     400-8702-898    E-mail：info@qingbio.com 網址：http://m.huangyuansheng.cn     QQ:514713116

ATCC CCL-248~T84~人結腸腺癌肺轉移細胞特點和簡介

  T84細胞株是從一位72歲男性結腸癌患者的肺轉移灶建立的可移植人類癌細胞株。 腫瘤組織皮下接種于BALB/c裸鼠，并連續進行移植。 [26072］ 在裸鼠身上的移植過程中，細胞株始終保持結腸癌的原始組織性狀。 [26072］ 在無胸腺小鼠中傳代23代后建立了T84細胞株。 這些細胞單層生長到飽和并在接觸細胞間展現出緊密連接和橋粒。 [1155] 有很多關于多肽類激素和神經遞質并維持定向電解質傳輸的受體。 [1155］ 這株細胞展現了接觸細胞中的緊密連接和橋粒。 [1155］ 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。

ATCC CCL-248~T84~人結腸腺癌肺轉移細胞接受后處理

1) 收到ATCC CCL-248(T84)細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發給我們。

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。

3) 棄去T25瓶中的培養基，添加 6ml本公司附帶的完全培養基。

4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養 基。

5) 接到ATCC CCL-248(T84)細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯 系。

ATCC CCL-248~T84~人結腸腺癌肺轉移細胞培養操作

1）復蘇細胞：將含有 1mL ATCC CCL-248(T84)細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基 混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有 細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜） 。**天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察ATCC CCL-248(T84)細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作 臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后， 加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清 和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液 ，注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記 錄凍存管位置以便下次拿取。

ATCC CCL-248~T84~人結腸腺癌肺轉移細胞培養注意事項

1. 收到ATCC CCL-248(T84)細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題，責任由客戶自行承擔 。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁，若細胞 仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養基再 次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下 照片及時和我們聯系，信息確認后我們為您再免 費寄送一次。

4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養，待細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞 傳代時 可以 一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和 ******* 技 術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細胞僅供科研使用。

  合肥星肽生物科技有限公司作為美國ATCC專業代理商，專業經營ATCC菌種、ATCC原代細胞、培養基、抗體、生物試劑、耗材等，合肥星肽生物科技有限公司與ATCC共同努力致力于為客戶提供可靠的研究材料以及方便快捷的服務，對購買項目的前期資料提供,中期合同保證,后期貨物跟蹤到*終售后的確保項目準確到位，都有相關專業人士進行維護,確保您在合肥星肽生物科技有限公司獲得*上等服務！

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